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離子排阻色譜柱可以反沖嗎?
發布時間:2017-03-22   點擊次數:1248次


? ??離子排色譜柱上基本都有“-->”標志,表示流動相的流動方向,有的在色譜柱上印有“Nerver Lot Flow in the OppositeDirection”字樣,翻譯成“決不能反沖”的意思,色譜柱可以反沖嗎、色譜柱能不能反沖的問題爭議很大,但在我們工作中,用色譜柱反沖技術修復色譜柱收到柱效提高、柱效恢復的效果。

? ? 離子排色譜柱使用一段時間后柱效下降,此時可拆下柱入口端螺帽,去掉1-2mm被污染填料,再用相同填料填滿,然后用流動相反沖一下,可使柱效恢復,因反沖可以改善柱頭死空間。
因反沖可把沉積在過渡板上的細微顆粒沖走,有時也可用反沖技術使柱壓降低。
?
一些反沖離子排斥色譜柱的方法:
一、如果是已經保存好的色譜柱:
? ? ? ?1、反向接柱,先用 95 水:5 乙腈, 0.2 ml/min流速,沖 20 倍柱體積;
? ? ? ? 2、然后用四氫呋喃,0.2 ml/min流速,沖 20 倍柱體積;
? ? ? ? 3、最后用 95 乙腈:5 水,0.2 ml/min,沖 20 倍柱體積;
? ? ? ? 4、正向接柱,用 65%乙腈水保存色譜柱。
二、如果是剛走完樣的色譜柱,那么請按照下列步驟進行:
? ? ? ? 1、卸掉保護柱
? ? ? ? ?2、正向接柱,常規方法沖洗色譜柱(先 95水,后 95 乙腈或甲醇);
? ? ? ? ?3、反向接柱,先用 95 水:5 乙腈 0.2 ml/min,沖 20 倍柱體積;
? ? ? ? ?4、然后用四氫呋喃,0.2 ml/min,沖 20 倍柱體積;
? ? ? ? ?5、最后用 95 乙腈:5 水,0.2ml/min,沖 20 倍柱體積;
? ? ? ? ?6、正向接柱,用 65%乙腈水保存色譜柱。
?
注意:
? ? ? ? 1、20 倍柱體積:250*4.6mm色譜柱約 80ml 流動相,150*4.6mm色譜柱 約 48ml流動相。
? ? ? ? 2、反向接柱時不要接檢測器!

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